羊肚菌的多孢分离步骤包括采集样品，制备接种基质，洗涤和筛选孢子。

首先，从自然界中采集羊肚菌样品。

接下来，用适当的营养基质制备培养基，将羊肚菌样品接种到培养基中培养。当培养出单个菌落时，进行子培养直至得到最大的孢子产生量。

接着，用生理盐水或其他适合的清洗溶液对孢子进行洗涤，去除未成熟的孢子和残留物。

最后，用细胞筛等方法分离出纯净的孢子，用于后续的研究和应用。